新疆苏云金杆菌35高效菌株小试生产发酵影响因子的研究

摘要

通过以棉铃虫4 龄幼虫为供试昆虫的生物测定，对从新疆兵团145 团棉田自然死亡棉铃虫体内分离筛选到的一株高效苏云金杆菌（ Bacillus thuringiensis, Bt）菌株35，进行了发酵工艺的初步研究。对Bt 菌株35 进行了摇瓶发酵和小试发酵，利用2L 全自动发酵罐优化了发酵培养基和操作条件。优选培养基的组分为：棉籽饼3.25﹪、玉米粉1.4﹪、麸皮1.2﹪、KH2PO4 0.11﹪、FeSO4 0.0049﹪，该培养基与对照培养基相比，发酵液含菌数高达40.8×108cfu/mL, 比对照培养基提高了63.7﹪，发酵液毒力高达66.1﹪，比对照培养基提高了81.5﹪。利用CaCO3 调节pH 值，可使活菌数提高37﹪，发酵周期缩短9h；28℃发酵活菌数比30℃增加12.1﹪，发酵时间延长3h，最适发酵产孢温度为30℃；以芽孢接种，其发酵时间比营养体接种延长3h，最优接种方式为营养体接种；溶氧对发酵有较大的影响，当发酵全程采用1:0.8vvm 的通气量时，最终发酵菌数为38.1×108cfu/mL；当发酵前期、中期、后期的溶氧分别为1:1.0vvm、1:1.4vvm 及1:1.2vvm时，活菌数可达72.5×108cfu /mL，发酵水平提高约1 倍。对Bt 发酵液进行生物测定，发酵原液（Bt 离心沉淀物+上清液）的LC50 比去掉上清液的沉淀物提高了37.1﹪，说明上清液能提高发酵液的毒力。