杉木木材形成过程特异表达基因的鉴定与分析

摘要

木材是需求快速增长全球性的重要的工业原材料。研究木质部木质化过程及其生物学特性对于了解木本植物水分和矿物质的吸收及运输机制，木材形成的遗传控制，改良材性及提高木材生长量具有十分重要的意义。杉木是一种广泛种植的重要的建材和纸浆树种。为了获得杉木木质化过程中特异表达的基因，本研究利用抑制差减杂交技术，以杉木突变体独干杉无性系为测试方(Tester)，正常的句容0号无性系为驱动方(Driver)，构建了正向差减文库，获得了618个克隆。利用通用引物T7和SP6进行PCR及EcoRI酶切鉴定文库重组子，同时，利用点杂交技术，以正向差减、反向差减及未差减的四种探针，进行了进一步的筛选阳性克隆。用定量PCR对结果进行了初步验证。260个单一ESTs中60％的与已知蛋白具有显著同源性，可分为4个主要类别：新陈代谢、细胞生成和结构重构、信号传导和胁迫。系统分析参与杉木木材形成的基因对了解木质部分化的分子机制具有重要意义，是了解木材形成遗传控制的直接信息来源，也是改良材形和纤维性质的潜在候选基因。