分枝杆菌噬菌体D29快速检测牛分枝杆菌的研究

摘要

建立牛分枝杆菌噬菌体快速检测技术，探讨最佳的检测条件，并将建立的方法用于牛分枝杆菌及20种常见分枝杆菌和6种非分枝杆菌的检测。结果表明，噬菌体工作浓度为1×108PRU/ml、37℃感染2h为最佳检测条件。杀毒剂浓度在100mmol/L，室温作用10min即可完全杀灭受试噬菌体。选择浓度为4mg/ml的对数生长期指示细菌为工作浓度，获得理想的检测结果。加热灭活的细菌和指示细菌不被噬菌体感染。牛分枝杆菌和耻垢分枝杆菌检测结果为阳性，16种常见分枝杆菌和6种非分枝杆菌检测结果均为阴性，4种NTM(偶然、胞内、金色、草分枝杆菌)在高浓度时(>105条/ml)检测结果为阳性。该法可检测出60～120条/ml牛分枝杆菌。重复性试验表明，批内、批间变异系数均小于15%，重复性良好。该法检测牛分枝杆菌具有快速、经济、易操作等特点，但测定条件的选择非常重要。