卡巴氧致突变作用的分子机理研究

摘要

本文将短暂复制型穿梭质粒pSP189与非洲绿猴肾细胞(Vero细胞系)组成穿梭质粒/哺乳动物细胞诱变检测系统,检测卡巴氧的诱变性,通过对靶基因Sup FtRNA序列的分析得到了卡巴氧对其DNA一级结构上的作用位点、突变类型和突变序列特异性等信息.穿梭质粒pSP189经50μg·ml-1卡巴氧处理30min后,转染Vero细胞,从细胞中回收质粒并转化E.coli MBM7070指示菌筛选突变体.结果显示卡巴氧处理组的突变频率明显高于溶剂对照组;对38个突变子质粒靶基因进行序列分析,发现卡巴氧引起质粒靶基因核苷酸序列改变主要表现为点突变、缺失和单碱基插入,且以引发点突变为主,占突变总数的76％.点突变发生在G∶C碱基对,部分位点包含在5'-NNTTNN-3'的序列中,其中的N位易发生突变,而连续缺失的序列包含在合ANGGCCNAAA的序列中;插入的单碱基主要是A,75％的插入位点集中在CC之间.