禽流感病毒ELISA检测方法的建立和初步应用

摘要

本研究使用抗禽流感病毒NP蛋白的单抗作为包被抗体,纯化的兔抗AIV-NP作为一抗,羊抗兔IgG-HRP作为二抗,建立了检测禽流感病毒的双夹心ELISA方法.样品使用Triton X-100处理后最低检测量可达2.5ng.15个HA亚型(H1-15)的禽流感病毒使用此方法检测均为阳性,而其他一些禽病病原检测为阴性.与鸡胚分离同时检测805份鸡的组织样品,两者符合率达到了98.6％.使用本方法与我国市场上使用的禽流感快速诊断试纸条(韩国安捷公司)在湖南省兽医总站同时检测了83份病料,符合率达到了96.4％.本方法具有较好的特异性,较高的敏感性,适合作为通用地检测禽流感病毒的有力工具.