骨髓增生异常综合征全基因组CpG岛甲基化及健脾补肾解毒方的干预研究

摘要

目的：探讨与骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndrome,MDS)发病机制相关的甲基化调控基因及健脾补肾解毒方改善MDS甲基化状态的有效性和作用机制,为临床治疗MDS提供理论依据.rn 方法：利用MBD(甲基化结合蛋白结构域)亲和层析柱结合第二代高通量测序(SolexaGenomic DNA-Sequencing)技术对MDS不同危度患者、急性髓细胞白血病(AML)患者、正常志愿者以及健脾补肾解毒方干预后MDS患者的骨髓单个核细胞全基因组CpG岛甲基化进行测序和生物信息分析,运用甲基化特异性PCR(MSP)法进行验证;同时对不同危度MDS、AML患者和正常志愿者的血、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、SF(血清铁蛋白)、LDH(乳酸脱氢酶)进行检测和分析.rn 结果：随着MDS疾病危险度的升高，全基因组CpG岛甲基化谱、CpG岛甲基化位点、CPG-island甲基化数量与外周血LDH、血尿β2-MG,SF具有较强的平衡相关性。rn 结论：(1)MDS患者各组全基因组CpG岛甲基化谱、CpG岛甲基化位点、CPG-island甲基化数量、外周血LDH、血尿β2-MG,SF水平与MDS的危度增高具有总体相关性;(2)健脾补肾解毒方有效治疗MDS的重要机制是调整基因的甲基化状态，其依据主要是改善全基因组甲基化谱式，减少甲基化差异基因CPG-island数量，降低甲基化差异区域/甲基化峰(DMR)，调节基因启动子区域CPG-island甲基化状态;(3)健脾补肾解毒方治疗MDS的作用靶点可能是通过甲基化表型(CIMP)途径，影响了一组或多组不同生物学功能和不同分子信号转导通路的基因启动子区域甲基化，导致该组生物学功能相关基因RNA表达发生改变，从而发挥相应的生物学治疗功能。