阿司匹林抑制TNF-α诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞NF-KB活化且增强其凋亡

摘要

目的：探讨阿司匹林对肿瘤坏死因子因子(TNF-α)诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞NF-κB信号传导通路活化的影响以及对TNF-α诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响。 方法：原代培养瘢痕疙瘩成纤维细胞,细胞分为空白对照组、50ng/mlTNF-α处理组、1.0mM、2.5 mM、5.0mM以及10.0 mM阿司匹林预作用2h后TNF-α再处理组,作用时间为15min,抽提细胞浆与细胞核蛋白。应用WesternBlot技术检测细胞浆IκB-α蛋白表达水平,TransAMTMNF-κBp65 Kit试剂盒检测细胞核NF-κBp65DNA结合活性水平.作用时间为1h,利用免疫荧光技术观察NF-κB P65及其上游抑制因子IκB-α亚细胞分布.1.0mM、5.0mM、10.0mM阿司匹林预作用细胞2h后TNF-α再处理24h,应用流式细胞仪检测不同处理组瘢痕疙瘩成纤维细胞的凋亡率。 结果：TNF-α刺激瘢痕疙瘩成纤维细胞导致细胞浆IκB-α蛋白水平降低,NF-κB P65从细胞浆转移至细胞核,NF-κB p65 DNA结合活性水平增高；阿司匹林可以阻止细胞浆IκB-α的降解,从而抑制NF-κB P65的细胞核移位以及NF-κBp65 DNA结合活性水平的增高。同时,阿司匹林可以促敏瘢痕疙瘩成纤维细胞对TNF-α诱导的凋亡,其作用强度呈剂量依赖性。 结论：阿司匹林可以有效阻止TNF-α诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞NF-κB信号通路的活化,增强TNF-α诱导的凋亡,研究结果显示阿司匹林有望成为以TNF-α干预作用为基础的治疗瘢痕疙瘩的临床手段。