Triton X-114萃取法去除流脑荚膜多糖中的内毒素

摘要

目的：使用相分离方法从A群流脑荚膜多糖中去除内毒素。rn 方法：1％Triton X-114与荚膜多糖溶液在0℃混合均匀，然后分别加热至25℃、37℃、56℃，观察分层情况。离心后收集上层水相。对其中残余萃取剂Triton X-114进行去除方法的选择。在进一步的实验中，比较了荚膜多糖浓度对萃取的影响，并进行二次萃取实验，对终产物进行了各方面的检定。对W135群和Y群流脑荚膜多糖进行萃取的比较实验。rn 结果: 最终选择56℃10分钟作为升温条件，3000转/分，10分钟离心可得到去除超过99％内毒素的产物，残余的TritonX-114选择透析法去除。荚膜多糖浓度越低越易于萃取；二次萃取多糖回收率大于85％。经检测，终产物荚膜多糖的分子量基本没有改变，免疫原性与处理前基本没有差异，异常毒性合格。W135群和Y群流脑荚膜多糖的萃取实验也得到了与A群多糖相似的结果。rn 结论: Triton X-114萃取法可以用于去除流脑荧膜多糖中的内毒素。