金葡菌肠毒素A成熟肽基因序列的克隆及抗原性分析

摘要

金萄菌肠毒素A(SEA)是金萄菌产生的致病物质之一,是引起食物中毒的重要因素。同时作为超抗原家族的一员,SEA具有与其他超抗原一样的功能,能直接结合于MHC II类分子沟槽外侧和T细胞TCR的Vβ区刺激机体T细胞大量增殖并释放细胞因子,如IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-6、IL-12等。作为强效型的免疫调节剂和细胞因子诱导剂,SEA在肿瘤免疫治疗领域一直受到重视,并有大量的应用研究文献。但是,作为超抗原,SEA所具有的抗原性却一直被忽视,因此造成应用进程缓慢,虽然SEA已有数十年的研究历史,但是至今没有这类毒素安全、稳定地应用于临床的报道。抗原性表位预测是一种新型生物信息学研究方法,经过近年的发展已日渐完善。本实验采用Touchdown PCR技术从产SEA的金黄色葡球菌标准菌株26079基因组DNA中成功克隆出SEA成熟肽编码基因，并利用生物信息学软件在线分析成熟肽各区段上的抗原性，为靶向性免疫毒素的构建及后续的抗原性(Allergenicity，过敏原性)弱化，并最终应用于肿瘤治疗奠定基础。