高效液相色谱-二极管阵列检测法检测蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量

摘要

目的:利用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)建立了测定蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量的新方法.方法:选取对硝基苯-β-D-麦芽三糖作为γ-淀粉酶的酶解底物,于55℃和pH 4.50的0.10mol/L乙酸钠缓冲液中反应90min.采用C18柱分离底物和酶解产物对硝基苯-β-D-葡萄糖,流动相为乙腈/水(15/85).通过测定酶解产物的含量来确定γ-淀粉酶残留量.结果:本方法的线性范围为1～50U/kg,定量限为1U/kg,回收率在94.0～107.2 ％之间,相对标准偏差在3.2～5.1％之间.采用本方法对市售蜂蜜和淀粉类糖浆共58个样本进行考察,γ-淀粉酶检出率为79.3％.采用本方法测定一个掺入5％淀粉类糖浆的蜂蜜,测得γ-淀粉酶残留量为3.6U/kg.结论:本方法能够有效的从酶学的角度快速鉴定蜂蜜中淀粉类糖浆的掺假.