Bacillus licheniformis NK-03聚谷氨酸合成酶基因pgsBCA的克隆

摘要

γ-聚谷氨酸γ-PGA是一种弱阴离子型的氮基酸聚合物，由D-或L-谷氨酸通过γ-酰胺键连接而成.具有水溶性，可生物降解，安全无毒，可食用等独特理化和生物学特性，可作为生物多聚物絮凝剂、重金属/放射性核素吸附剂、药物载体以及应用于医药、食物、化妆品等其他领域中的胶粘剂，其中分子量以及立体构型便是决定γ-PGA应用方向的两大重要因素.随着人们保护环境的意识日益增强，近十多年来，γ-PGA越来越受到了世界上许多国家的关注，也成为了研究生物降解高分子材料的热点之一。rn 该研究分离到一株能合成，γ-聚谷氨酸(γ-PGA)的细菌，通过16S rRNA序列同源性分析、计算机微生物分类鉴定系统BIOLOG一System 4. 20和基本生理生化实验等方法，确立该菌株为地衣芽抱杆菌，命名为Bacillus licheniformis NK -03。该菌合成的}y - PGA所含的L一谷氨酸单体可高达98 %，且重均分子量(Mw)为1,360,000。同时，利用pXM,J19质粒将B. licheniformis NK -03的，一PGA合成酶基因pgsBCA克隆到了Escherichia coli JM109中，使其成功表达合成了y一PGA，共成菌所合成的分子量为:Mw=42 ,433。