对虾血清中与病原菌相结合的主要蛋白的发现与鉴定

摘要

以凡纳滨对虾为研究对象,将其血清分别与溶藻酸弧菌,哈维氏弧菌,嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌等4种病原菌孵育,采用亲和蛋白质组学和Western-blotting等分子生物学方法纯化、鉴定和确证其中可与病原菌直接结合的蛋白.结果发现,与对照组相比4种病原茵与虾血清孵育5h后均可与对虾血清中分子质量约为7 5000(p75)的蛋白相结合,而孵育15h后既可与p75相结合,还可与分子质量约为77000(p77)的蛋白以及0-4种不同分子质量的蛋白相结合。rn 经MALDI—TOF/MS分析和Mascot搜索引擎检索,p75和p77蛋白分别与凡纳滨对虾中分子质量约为75000、77000的2个血蓝蛋白亚基具有显著一致性。尤其是p75蛋白还可与兔抗血蓝蛋白75000亚基抗体发生特异性结合。由此推断,凡纳滨对虾血清中与病原菌直接结合的主要蛋白为血蓝蛋白,提示血蓝蛋白全蛋白可能具有抗菌活性。