猪流感病毒通用型荧光RT-PCR检测方法的研究

摘要

本研究通过GeneBank设计猪流感特异荧光引物、TaqMan探针,以H1N1为例,对荧光RT-PCR的反应条件进行了一系列的优化,最终确定了反应条件。并成功克隆了猪流感基因特异基因片断,作为检测猪流感病毒的标准品.随后对此方法进行了灵敏性、敏感性、特异性、稳定性检测；灵敏性研究检测表明此方法可对10-8鸡胚半数致死量的病毒进行有效的检测。敏感性研究表明此方法对猪流感其他亚型H3亚型、H4亚型、H7亚型、H9亚型也能很好得检出,并且其灵敏度和H1亚型相当.特异性研究表明此方法对猪流感有很好的特异性。此方法应用于临床,对大量的病料检测表明,此方法相比其它现有检测方法对猪流感病毒有较高的检出率。