研究胸膜肺炎放线杆菌的流行病学方法: 分型的新方法及对未来的展望

摘要

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆引起的猪的一种高度接触传染性呼吸道疾病,给世界各地的养猪业造成了巨大的经济损失.分型作为当前菌株鉴定的金规则已经成为流行病学监控主要手段,为进行正确治疗,防疫疾病或实施扑灭计划提供了有用的指导.胸膜肺炎放线杆菌有16种血清型(1-4,5a,5b,6-15),在不同区域流行着不同优势血清型。经典的血清分型方法是利用兔血清与不同表面多糖之间发生的免疫反应。传统的血清分型的方法包括补体结合实验,间接血凝实验,ELISA,凝集实验,乳胶凝集反应,间接荧光抗体标记技术,免疫扩散,环状沉淀试验.这些实验都有共同的缺陷:个别批次被检验的血清检验结果重复性不好,而且不同的血清型之间有着交叉反应,如在3、6、和8型之间存在交叉反应。为了避免使用免疫学方法,研究们选择了基因分型的方法,如利用多重PCR反应可以鉴定血清型为2、5、6和8型的菌株.现在本文介绍一种3型菌的特异PCR,它可以和Apx Ⅳ基因的特异PCR组合成多重PCR.其他用于流行病学和的鉴定研究方法还有核糖分型,核糖体基因间区域序列分析,脉冲场凝胶电泳,限制酶切指纹,aroA基因PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP),16S RNA的序列分析,RAPD分析和脉冲场凝胶电泳等等。目前,通过分析表达了ApxⅠ-Ⅲ和外膜蛋白OmlA的基因已经用于基因分型。然而通过己发表的三篇论文对胸膜肺炎放线杆菌进行多位点。酶电泳分析(MLEE)研究,可以推测多位点。序列分析(MLST)将会是这种重要病原菌在流行病学和进化研究中的一个有用的工具.MLST包含互不相邻而分散于基因组中可能和免疫选择相关的7个看家基因的DNA序列.MLST不同与传统实验室技术所产生的含糊数据,它可以通过互联网与全世界其他实验室快速分享数据。通过检测从丹麦,中国和英国分离菌株所得到的前期数据显示:MLST在血清分型上更清晰确切,而且在流行病学研究和从微观(动物)与宏观(所有生物)上理解胸膜肺炎放线杆菌的进化都显示出了重要性。