醋酸钙不动杆菌PHEA-2苯甲酸降解基因簇的克隆及功能的研究

摘要

苯甲酸是多种芳香化合物生物代谢的中间产物,广泛应用于塑料、食品、燃料、制革、合成橡胶等行业,对人类健康和生态环境危害巨大,被国际环境保护组织列为最主要的环境污染物之一.在自然环境中,某些微生物具有降解这类化合物的能力,对这些微生物的研究一直是人们关注的热点. 本实验室从某炼油厂废水中分离到一株高效降解苯甲酸和苯酚的菌株--醋酸钙不动杆菌PHEA-2,它最大耐受苯甲酸的浓度为60mM,远远高于目前报道中细菌的最大苯甲酸耐受性.通过基因组文库筛选的方法,获得了约10 Kb的苯酚降解基因簇.该基因簇下游有一功能未知基因ORF8,ORF8位于苯甲酸降解基因簇的上游.因此我们构建了带有卡那霉素抗性的突变株A2P342-16,作为筛选包含未知基因的良好的标记。