粉纹夜蛾抗BT晶体毒素细胞和敏感细胞的分子生物学比较研究

摘要

苏云金芽孢杆菌(Bt)是一种安全、有效、环境友好型生物杀虫剂，随之广泛应用，害虫也对BT的毒素产生了高水平的抗性，因此进一步了解抗性发生的分子机制在Bt的应用中十分重要。本文对选育的抗Bt Cry1Ac毒素的细胞进行一些分子生物学比较研究。发现敏感细胞的膜蛋白制备物中存在两个与Bt Cry 1Ac毒素特异性结合的靶位点，分子量分别为37KD和34 KD；而抗性细胞膜制备物中只有34KD处的蛋白是与Cry1Ac毒素特异性结合的靶位点。并且两种细胞的在抗性细胞的2-DE总蛋白图谱上检测到的平均蛋白质点数可达到707±25个，在敏感细胞的总蛋白2-DE图谱上检测到的平均蛋白质点数可达到637±19个，其中分辨率高重复性较良好的显著差异点有10多个。对其中一些差异斑点测定了肽质指纹图谱，经数据库查询，初步鉴定差异蛋白质为一些与胞质外周蛋白，脂多糖生物合成蛋白和免疫球蛋白重链等具同源性的蛋白质。在敏感和抗性两种细胞的2-DE总膜蛋白图谱上检测到的平均蛋白质点数可达到260多个，其中显著差异点有10余个。