封闭带毒素△G功能片段促进H5N1亚型禽流感粘膜免疫的佐剂活性研究

摘要

本研究扩增了霍乱弧菌封闭带毒素ZOT基因编码264～399氨基酸残基的C末端△G功能片段，插入表达质粒pBCX，构建了表达△G片段的融合蛋白表达载体pBCX_△G。将重组质粒转入表达菌BL21(DE3)中，在终浓度1mmol/LIPTG诱导下进行表达，表达的融合蛋白△G分子量约为45ku。用50%Ni-NTA蛋白纯化树脂以非变性方法纯化融合蛋白△G，获得了纯度较高的蛋白△G。融合蛋白ΔG与H5N1亚型禽流感(AIV)联合通过滴鼻免疫途径免疫SPF鸡，结果表明：pBCX-△G融合蛋白起到了很好的粘膜免疫佐剂作用，且1?g/mL高剂量添加组的免疫增强效果更明显。