含禽源启动子的禽流感病毒核蛋白表达载体的构建及其免疫原性的检测

摘要

为了研究禽流感病毒核蛋白在鸡体内所引起的免疫反应，将其NP基因从重组质粒pVAX-NP上酶切后亚克隆至含禽源启动子的真核表达载体pCAGGS中，经筛选鉴定后获得重组子pCAGGS-NP，将鉴定正确的阳性重组子体外转染真核细胞，利用间接免疫荧光法检测目的基因的瞬时表达；采用腿部肌肉注射途径将重组子免疫SPF鸡，利用ELISA检测免疫后血清抗NP蛋白抗体效价。实验结果表明，该重组子无论在体外还是体内均能正确表达禽流感NP蛋白，且所表达的蛋白均具有良好的免疫原性。