CpG-ODN促进犬瘟热核酸免疫的研究

摘要

为提高犬瘟热病毒(canine distemper virus，CDV)核酸疫苗的免疫应答水平，合成了4条CpG-寡脱氧核苷酸(Cpc－oligodeoxynueleotides，CpG－ODN);通过体外淋巴细胞增殖试验确定了1条刺激活性最显著的CpG－ODN，序列为TCGTCGTTTT GTCGTITTGTCGT。将30只健康毕格犬随机均分为二大组，每大组再分为5小组，分别以不同的剂量肌肉注射CDV附着蛋白(H)重组质粒peDNA－H和选定的CpG－ODN。在免疫的后第2w、4w、6w分别测定各组动物的抗CDV中和抗体和干扰索水平。结果表明选定的CpG-ODN对提高抗CDV中和抗体效价和干扰素水平具有一定作用，且与对照组差异显著(P<0.05);但不同剂量的质粒pcDNA－H和CpG-ODN影响不同，其中以30 μg/只的CpG－ODN和50μg/只的pcDNA－H的剂量组合效果最佳。以选定剂量的cpG－ODN和pcDNA－H免疫5只健康毕格犬，同时以质粒pcDNA－H与生理盐水作为对照;4周后所有动物均接种CDV组织匀浆毒。结果发现试验组动物均未出现犬瘟热临床症状，且攻毒后第3周CDV检测为阴性，而peDNA－H对照组和生理盐水对照组动物的CDV检测阳性率为2/5和5／5;这表明CpG能够明显促进重组质粒peDNA－H的免疫保护作用。