Rac1表达及其活性对人乳腺癌细胞侵袭力的影响

摘要

目的：比较Rac1 表达及其活性在正常人乳腺细胞HUMEC，以及不同侵袭能力乳腺癌细胞系MCF-7，MDA-MB-231 中的差异，并观察转染Rac1-siRNA 片段对乳腺癌细胞MCF-7，MDA-MB-231 中Rac1 表达和活性以及细胞侵袭力的影响。rn 方法：以Western blot和GST Pull down方法分别检测Rac1和active-Rac1在 HUMEC，MCF-7和MDA-MB-231 乳腺细胞系中的表达。利用计算机辅助设计 Rac1 特异性siRNA，体外化学合成Rac1序列特异性双链RNA（dsRNA），以脂质体法转染Rac1-siRNA 至乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231。以Western blot和RT-PCR方法鉴定Rac1-siRNA对Rac1 表达的作用，Transwell实验测定转染前后细胞穿透matrigel的能力。rn 结果：高侵袭力的MDA-MB-231 乳腺癌细胞系内Rac1 表达量及活性明显高于低中侵袭力的MCF-7 乳腺癌细胞系以及正常人乳腺细胞系HUMEC。转染 Rac1-siRNA 48小时后的乳腺癌细胞系MCF-7，MDA-MB-231中Rac1的mRNA和蛋白水平的表达均被干扰片段有效沉默（P<0.05）。转染Rac1-siRNA 48h后人乳腺癌细胞MCF-7，MDA-MB-231的侵袭力均明显降低（P<0.01）。rn 结论：Rac1表达及其活性影响人乳腺癌细胞侵袭能力，而Rac1-siRNA能有效抑制人乳腺癌细胞株Rac1 mRNA和蛋白的表达，并降低其侵袭力。