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发色底物法快速测定α1-抗胰蛋白酶活性的方法

摘要

目的:应用发色底物法测定α1-抗胰蛋白酶(α1-Arnitrypsin,α1-AT)生物活性,研究正常人混合血浆为参考标准的血浆(108人份)稀释度范围和测定的影响因素。rn 方法:采用酶标仪测定抗胰蛋白酶与过量的胰蛋白酶(Trypsin)反应后,剩余的胰蛋白酶与N2-苯甲酰-DL-精氨酸对硝基苯胺盐酸盐(BAPNA)发色反应的OD值(405nm),观察不同时间和不同胰蛋白酶浓度对反应的影响,优化正常人混合血浆稀释度范围,建立并验证血浆标准曲线。rn 结果:通过优化实验,血浆的稀释倍数在1/50-1/100之间有良好的线性。rn 结论:以正常人混合血浆为参考标准品,用酶标仪测定α1-AT的生物活性,方法快速、准确,稳定可靠。

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