肠安Ⅱ号方拮抗TNF-α破坏肠黏膜屏障的作用研究

摘要

作为胃黏膜黏液层后抵御微生物和抗原的第一道防线,肠黏膜屏障的完整性与稳定性是胃肠道发挥正常功能的重要保障.既往研究表明,肠黏膜屏障破坏是一个相当复杂的过程,可涉及微生态、免疫及分子生物学等诸多领域.本实验中，笔者利用Caco-2细胞体外培养建立肠上皮紧密连接模型，以TNF-α作为诱导剂处理后，结果显示模型组上皮细胞跨膜电阻值随作用时间显著降低，荧光黄通透率显著升高，透射电镜下可见胞膜表面微绒毛减少，紧密连接结构断裂，缝隙连接增宽；而用药组分别给予肠安Ⅱ号方高、中、低剂量与黄连素后，各组细胞在一定时间内均出现跨膜电阻值不同程度的升高，荧光黄通透率下降，尤以中药高剂量组作用最为显著，持续时间最长。此外，透射电镜下观察用药各组细胞微绒毛形态与紧密连接结构，提示肠安Ⅱ号方与黄连素均可拮抗由TNF-α诱导的肠黏膜屏障功能破坏。肠安Ⅱ号方由经典名方"痛泻要方"酌加炮姜炭、马齿苋等品化裁而来，意在疏肝健脾，温中化湿止泻。而痛泻要方作为治疗"痛泻"的代表方剂，因其临床疗效显著，已引起众多中医学者对其进行深入探究。现代药理学研究表明，痛泻要方可通过调控脑-肠轴、调节内脏高敏感性、调控水通道蛋白的表达、调节肠道细胞因子失衡等机制发挥其治疗作用。而肠安Ⅱ号方在痛泻要方基础上酌加炮姜炭、马齿苋等品，可增强其温中化湿止泻之功。基于课题组前期研究结果，肠安Ⅱ号方能下调促炎细胞因子，上调抗炎细胞因子的表达而在肠道炎症状态下起到治疗腹泻的作用。鉴于TNF-α在炎性细胞因子中的关键作用，控制该因子的表达可阻断其与IL-6，IL-8等促炎细胞因子的联动效应。然而，肠安Ⅱ号方通过何种通路发挥其效应机制，仍需进一步深入研究。