兔左室肌三层细胞动作电位和L型钙离子流异质性的研究

摘要

目的:本实验用膜片钳技术研究正常兔心室内、外膜层及中层心肌细胞的动作电位时程(APD)跨壁离散度(TDR)和三层细胞的L-型钙通道电流的异质性,以及胺碘酮急性灌流对上述生理指标的影响。rn 方法:以混合气-二型胶原酶消化法分离兔左室游离壁内、中、外三层心肌,继而对其采用全细胞膜片钳分别记录在生理台氏液和10 μmol/L胺碘酮急性灌流两种不同情况下的AP和Ica-L,离子电流。rn 结果:(1)APD以中层心肌细胞为最长,内膜心肌细胞最短,外膜心肌细胞居中,APD 90分别为488.134±22.88 ms、326.36±14.51 ms和391.1±23 ms,P<0.05；TDR为185 ms。中层心肌细胞存在显著的1相切迹和2相驼峰。(2)应用胺碘酮后的三层心肌细胞动作电位APD 20,50和90,中层心肌细胞均显著缩短(P<0.05),内膜层显著延长(P<0.05),TDR明显减小。胺碘酮对动作电位的形态无影响。(3)正常兔三层心肌细胞的ICa-L电流密度存在明显差异,外膜细胞和内膜细胞的ICa-L电流密度分别为:6.21±1.35和7.204-0.83 pA/pF。M细胞的ICa-L电流密度较大为11.59±3.71pA/pF, P<0.05。三层细胞的ICa-L电压-电流曲线形态和电压依赖性无差异。(4)10μmol/L胺碘酮急性灌流对ICa-L的影响,在内、外层细胞和中层细胞均有所抑制,但只有中层心肌细胞有统计学意义11.594±3.71 vs7.28±2.01,(P<0.05)。胺碘酮对三层心肌细胞的ICa-L的电压-电流(Ⅰ-Ⅴ)曲线形态和电压依赖性无差异。rn 结论:(1)兔三层心肌细胞的AP存在明显的异质性,M细胞拥有明显大的APD,Endo细胞的APD最短,三层细胞的TDR较大。外膜细胞的AP形态有大的2相穹窿,M细胞拥有小的穹窿和尖锐的0时相上升支,呈尖峰圆顶型。M细胞明显大的ICa-L,外膜心肌细胞和内膜心肌细胞的ICa-L大小相仿,三层心肌细胞的ICa-L的形态无差异。(2)胺碘酮延长内膜心肌细胞的APD,缩短中层心肌细胞的APD,使得TDR减小。胺碘酮能显著抑制中层心肌细胞的ICa-L,但不影响三层细胞的ICa-L的形态。