富血小板血浆联合钙化诱导对骨髓间充质干细胞增殖和成骨活性的影响

摘要

目的：观察富血小板血浆与地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠联合应用对体外培养的MSCs增殖和诱导成骨的影响.rn 方法：应用密度梯度离心联合贴壁筛选法从兔髂骨骨髓中分离、纯化MsCs，取第3代MSCs随机分为3组，空白对照组加入含10％血清DMEM培养基，钙化诱导组利用含有钙化诱导剂0.1μmol/L的地塞米松、50 mg/L的维生素C、10mmol/Lβ-甘油磷酸钠的DMEM培养基，联合诱导组加入含有1％富血小板血浆(PRP)及钙化诱导剂的DMEM培养基，诱导培养8d.rn 结果：诱导培养5d后，空白对照组碱性磷酸酶(ALP)染色弱阳性，钙化诱导组ALP染色为阳性，联合诱导组ALP染色为强阳性。诱导培养21d，两诱导组钙结节茜素红染色均呈阳性，MTT法显示诱导培养第2-5d联合诱导组细胞增殖明显高于钙化诱导组(P<0.05).ALP定量测定显示，联合诱导组于第3d、5d和7d，OD值均高于钙化诱导组(P<0.05).rn 结论：PRP与地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠联合应用于BMSCs的成骨诱导，优于单纯钙化诱导方法，且诱导的成骨细胞具有更好的增殖及成骨活性。