壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究

摘要

本文进行了壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究。对壳聚糖/siRNA纳米粒的物化性质如粒子体积、表面电荷、形态学和稳定性等进行了评价。壳聚糖/siRNA纳米粒表面呈不规则片状或树突状，其动态直径约148nm，zeta电荷为净阳性58.5mv。体外用壳聚糖/siRNA纳米粒转染过表达人直肠癌FHL-2基因的Lovo细胞，并利用RT-PCR,及westernblot进行了基因沉默FHL2表达的研究。RNA水平研究结果表明，壳聚糖/siFHL2纳米粒能有效沉默FHL2表达，沉默效率达到69.6%，市售脂质体Lipofectamine对照转染后的沉默效率为68.8%，两者沉默效果无统计学差异。Westernblot研究表明壳聚糖/siFHL2纳米粒转染细胞后能显著降低FHL2的蛋白表达水平。同时，用MTT法研究表明壳聚糖/siFHL2纳米粒能抑制直肠癌Lovo细胞的生长和增生。本文研究结果显示了壳聚糖纳米粒可以作为siRNA给药载体，具有体内应用的前景。