重组蚊浓核病毒的构建及其杀虫效果初步测试

摘要

目的：构建重组蚊浓核病毒，实验室初步测试其杀蚊效果。rn 方法：将东亚钳蝎Buthus martensii Karsch昆虫特异性毒素BmKIT1基因亚克隆入含有埃及伊蚊浓核病毒(Aedes aegypti densovirus，AeDNV)全基因组序列的质粒载体pUCA中，C端融合表达报告分子绿色荧光蛋白EGFP，构建成重组病毒质粒pUCA—BmKIT1-EGFP。以pUCA为辅助质粒与pUCA—BmKIT1-EGFP共转染C6/36细胞，通过病毒的自我拯救，获得重组病毒。采用real time PCR对病毒进行定量，感染实验室白纹伊蚊各期幼虫检测其杀虫效果。rn 结果： RT—PCR、westem blot显示转染后48h BmkIT1在C6/36 cell表达，荧光显微镜下可见绿色荧光。重组病毒感染蚊虫 48h后，荧光显微镜下可见绿色荧光。重组病毒感染组蚊虫半数生存时间与中位生存时间LT(50)。明显低于对照组(p≤0.01)。rn 结论：表达BmKIT1的重组蚊浓核病毒能更快速有效的杀伤蚊虫，可进一步开发为特异性的蚊虫生物杀虫剂。