离体骨骼肌肌条肌质网Ca2+释放功能的间接测量方法

摘要

目的：采用化学与生物物理方法测量肌质网功能时，由于肌质网制备过程改变其生理环境而不能真正反应其功能。本实验拟建立观测肌纤维肌质网钙离子释放功能的简便方法。rn 方法：采用大鼠离体比目鱼肌肌条灌流，分析间断强直收缩张力峰值到75％恢复的时间(TR75)，发现在间断强直收缩疲劳期，TR75呈现先快速延长然后缓慢缩短的过程。以延长至最大时的TR75除以第一次强直收缩的TR75，获得TR75延长比值(R-TR75)。rn 结果：增加刺激电压或者用5 mmol/L Caffeine灌流比目鱼肌肌条，这些增加肌质网Ca2+释放通道开放几率的条件作用下，TR75延长比值从对照组的2.5倍均增加到3.0倍。相反，灌流5 mmol/L硫酸镁抑制肌质网Ca2+释放通道，使TR75延长比值明显减小。第一次5min间断强直疲劳收缩后，恢复60 min再次进行间断强直疲劳收缩，两次的TR75延长比值间无明显差别，但是，缩短恢复时间为5 min或10 min，再次进行间断强直疲劳收缩期间的TR75延长比值呈显著减小。尾部悬吊2周去负荷萎缩比目鱼肌间断强直收缩的TR75值呈缩短趋势，但与对照组均值间无显著性差别。间断强直疲劳收缩期间，TR75延长比值增至2.9倍，明显高于对照组。rn 结论：上述结果提示：比目鱼肌肌条间断强直疲劳收缩期间，在肌质网Ca2+-ATP酶活性没有改变的条件下，TR75延长比值可间接反应肌质网钙释放功能。另外，去负荷两周萎缩比目鱼肌的R-TR75增加提示其肌质网钙释放功能增强。