人类免疫缺陷病毒Ⅰ型核心蛋白p24的分离纯化

摘要

目的：研究细胞培养方式表达的HIV-1p24gag蛋白纯化工艺，制备了单克隆抗体免疫、筛选以及多克隆抗体免疫用p24抗原。rn 方法：通过亲和标签层析纯化了原核表达的p24抗原，并利用原核表达p24抗原制备的单克隆抗体，筛选了一种亲和层析用单克隆抗体，利用免疫亲和层析及离子交换层析的方法从细胞培养上清中高效纯化了HIV-1p24蛋白。rn 结果：原核表达的重组p24蛋白经亲和标签层析柱纯化后纯度超过90%。纯化后的原核重组p24蛋白所制备的一种单克隆抗体可用于免疫亲和层析柱的制备。免疫亲和层析与离子交换层析相结合可高效的从细胞培养上清中纯化HIV-1p24蛋白，纯度超过95%，洗脱率大于90%。rn 结论：建立了细胞培养方式表达的天然HIV-1p24gag蛋白纯化工艺，为HIV-1第四代诊断试剂的研制奠定了基础。