体内诱导耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌膜蛋白组学研究

摘要

目的:研究膜蛋白在耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌中的作用。rn 方法:从同一住院病人体内分别收集碳青霉烯类敏感和耐药的鲍曼不动杆菌各一株。多序列位点测序分型(MLST)和细菌基因组外回文结构重复序列分型(REP-PCR)分析后，等电聚焦电泳检测其已知碳青霉烯类水解酶的表达，在此进行膜蛋白二维电泳和质谱鉴定分析，并应用PAβN外排泵抑制剂检测其外排泵相关膜蛋白表达，同时对其差异外排泵相关差异蛋白今天RNA的实时定量检测。rn 结果: MLST和REP-PCR结果表明耐药株来源与敏感菌株，属于同一型别；等电聚焦电泳在pI 7.6和9.0处在两株菌中检测到β-内酰胺酶，没有检测到任何已知的碳青霉烯类水解酶；耐药株和敏感株的差异膜蛋白组学鉴定出34KD外排泵膜蛋白和突变的OprD与CarO膜孔蛋白，且后续的外排泵抑制剂试验表明，在PAβN存在的情况下，耐药株的亚胺培南MIC由256μg/ml下降到8μg/ml，在耐药菌株中其RNA的表达较敏感菌株高4.855倍；同时质谱鉴定出三个与耐药没有直接联系的差异表达膜蛋白vitB12受体、Dca-P类似蛋白和OmpA。 rn 结论:本研究发现外排泵膜蛋白的过度表达伴随OprD和CarO膜孔蛋白的下调可能是临床分离耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌主要耐药机制。