猪肺炎支原体P46基因特异性噬菌体随机肽库的构建

摘要

通过构建猪肺炎支原体膜蛋白P46的噬菌体展示肽库，以筛选其特异性抗原表位。用DNase I随机消化法获取P46基因主要抗原序列(不含信号肽的编码序列)的随机片段，片段经与pBam H I Linker连接和BamH I酶切后，克隆到pc89 pⅧ型噬菌粒载体，重组噬菌粒转化感受态细胞XL1-Blue，辅助噬菌体VCSM13超感染，从而构建了B46基因特异性噬菌体随机肽库。结果，所建肽库含有约2.3×104个不同克隆，滴度约为1.3×1014FU/mL。说明所建肽库具有较大库容和较好的多样性，可满足P46蛋白抗原表位的筛选。