二维回转培养条件对骨细胞中PKD2蛋白定位表达和内钙含量的影响

摘要

空间失重环境下航天员发生骨量减少以及骨组织细胞结构功能和力学反应性的改变，可能与细胞力-化学信号转导过程有关。PKD2分子做为细胞膜上一个无选择性的阳离子通道，能将力学刺激信息转化为胞内化学信息(Ca2+信号)，在多囊肾病的发病机制中扮演了重要的角色。在骨细胞中，PKD2通道蛋白是否也参与了失重条件引起的力化学信号转导过程，是一个值得研究的问题。rn 本文利用双向多样本回转器进行二维回转模拟失重效应，利用共聚焦显微镜观察骨细胞MLO-Y4中PKD蛋白定位和细胞内钙表达的情况，采用RT-PCR和western blotting检测PKD mRNA和蛋白的表达。共聚焦显微镜观察显示，在骨细胞中，PKD2、PKD1和乙酰化a-tubulin表征的初级纤毛表现出细胞内共定位，且细胞内钙的浓度明显降低。RT-PCR结果显示二维回转培养骨细胞引起了PKD2和PKDI在mRNA水平表达的明显下降，同时westernblotting结果显示PKD2蛋白水平的表达显著降低。