禾谷镰孢菌α、β微管蛋白的原核表达及大量制备

摘要

小麦赤霉病由镰刀菌属(Fusarium)的几个种引起，其中禾谷镰抱菌(F.graminearum)是我国的优势种。过去小麦生产上一直采用苯并咪哇类杀菌剂如多菌灵、苯菌灵等来进行小麦赤霉病的化学防治。但自周明国等于1994年首次监测到对多菌灵产生抗药性的赤霉菌株以来，禾谷镰孢菌多菌灵抗药性菌株在群体中的比例逐渐升高。生产中急需开发出新的小麦赤霉病防治的多菌灵替代药剂。本研究拟以禾谷镰孢菌的微管蛋白为药剂筛选靶标，为新杀菌剂的开发做准备。本研究采用原核表达的方法，将禾谷镰孢菌的α、β微管蛋白基因克隆到原核表达载体pET30a及pET32a上，经过双酶切及测序验证，α、β微管蛋白基因均以正确的阅读框插入到载体的多克隆位点处。不仅为高通量筛选微管蛋白抑制剂能够提供分子靶标材料，而且为深入研究真菌微管蛋白的细胞学功能及抗药性分子机制奠定了基础。