IBV优势表位嵌合基因DNA疫苗构建与免疫原性研究

摘要

通过计算机软件分析并结合文献报道筛选出lBV结构蛋白基因s1、S2、N基因的T、B细胞的优势抗原表位区共7段，采用人工合成及PcR方法将各抗原表位串联成一条新的嵌合基因F，并成功构建了真核表达质粒pcDNA3．1-F。质粒用脂质体包裹后，经腿部肌肉多点注射7日龄雏鸡，二免后5周用IBV肾型强毒进行攻毒保护性实验。结果显示，质粒pcDNA3．1-F二免后1周，雏鸡外周血T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+T淋巴细胞)含量均有显著上升，血清中特异性ELISA抗体达较高水平;经同型强毒的攻击后，pcDNA3．1-F组保护率为80．0％(16，20)。表明构建的IBV优势表位嵌合基因质粒pcDNA3．1-F能够为接种鸡提供较好的免疫保护力，为IBV新型候选DNA疫苗的设计和应用提供了新的思路。