副猪嗜血杆菌SC-1株的分离培养及其基因组表达文库的初步构建

摘要

本研究以副猪嗜血杆菌四川分离株为材料，建立基因组表达文库。对分离纯化得到的疑似菌落进行革兰氏染色，将革兰氏阴性且具有多种形态的分离菌进行生化鉴定及PCR方法鉴定：提取分离株基因组DNA，然后用Sau3A I酶切基因组l h，胶回收0．5~2 kb之间的DNA片段，与经BamH I酶切并去磷酸化的质粒载体pRsET-a／b/c连接，电转化BL21(DE3)感受态细胞，构建该分离株的基因组表达文库。经鉴定该分离株为副猪嗜血杆菌，并命名为SC—1株;本研究初步构建了SC—1株的基因组表达文库，文库库容量约为16000个，随机挑选的阳性克隆外源片段PCR产物约为0．5~1．2 kb。本研究成功从四川地区分离鉴定了一株副猪嗜血杆菌SC-1株并初步构建了该菌株的基因组表达文库，为筛选副猪嗜血杆菌的体内诱导基因奠定了基础。