酶切RT-PCR产物鉴别猪瘟病毒强毒株和疫苗株

摘要

根据GenBank上已发表的猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2基因的高度保守区设计一对特异性引物，在该引物对跨越区内部找出Shimen株独有的限制性内切酶酶切位点BgⅢ，采取酶切RT-PCR产物的方法鉴别Shimen株和疫苗株，对该方法的特异性和敏感性进行检测。结果表明，应用该方法从Shimen株和疫苗株中均扩增出一条大小为750bp的特异性片段，疫苗株的RT-PCR产物不能被BgⅢ切开，Shimen株的RT-PCR产物则被切为大小分别为520bp和230bp的两条带。此方法可以扩增猪瘟病毒的E2基因保守片段，最小病毒RNA的检出量为3.96×10-4μg/mL.采用此方法检查了8例临床疑似猪瘟病料，结果1例感染猪瘟病毒强毒，另7例为猪瘟阴性.