对虾白斑综合症病毒(WSSV)单抗的制备及其在红螯螯虾病毒病检测中的初步应用

摘要

将提纯的感染红螯螯虾的WSSV,免疫BALB/e小鼠,三次免疫后取其脾细胞与SP2/0融合.间接ELISA进行筛选,阳性克隆经3次亚克隆后,共获得7株针对WSSV的特异性单抗,分别命名为E2、C2、E3、G3、C4、D5以及F10.细胞上清ELISA效价为1:1600～1:6400;抗体亚类鉴定结果表明:E2、G3、C4属于IgG1,C2、D5、F10属于IgG3,E3属于IgG2a亚类;单抗热稳定性试验表明7株单抗均是热稳定的.选取单抗G3和F10进行病毒中和试验,结果表明:在适宜的抗原浓度下,两株单抗均有较好的中和能力.选取单抗G3作为一抗建立了间接ELISA方法,通过对人工感染红螯螯虾WSSV的测定,初步证实该单抗可用于WSSV的检测,在生产上具有广阔的应用前景.