TGF-β1/Smad3信号转导通路对皮肤成纤维细胞调控作用的研究

摘要

目的：探讨TGF-β1/Smad3信号转导通路对皮肤成纤维细胞的具体调控作用及其机制。rn 方法:将原代分离培养并经过鉴定的小鼠皮肤成纤维细胞（野生型和Smad3 KO型）分为六组：野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Smad3 KO FB组和Smad3 KO FB+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后，直接以TGF-β1刺激或经SB431542预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞抽提总RNA，以实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1、Smad3、PCNA、MMP2、MMP9和TIMP-1的变化情况，细胞培养液上清经离心超滤浓缩后进行明胶酶谱分析，检测MMP-2和MMP-9的活性。rn 结果:TGF-β1促进成纤维细胞中TGF-β1、Smad3、PCNA、MMP2、MMP9的表达，抑制TIMP-1表达；抑制Smad3可显著增加MMP2和MMP9的表达并降低TIMP-1表达。rn 结论:Smad3抑制TGF-β1的自身正反馈，参与促进成纤维细胞增殖的信号途径，同时还对MMP2/9的表达起负向调控作用而对TIMP-1起正向调控作用。