T-超家族芋螺毒素B8.1T合成及氧化折叠研究

摘要

从海南产的桶形芋螺中发现了一个新的T-超家族芋螺毒素B8.1T，其氨基酸序列为DCCPESPPCCH，具有两对二硫键，其连接方式为Cys2-Cys9，Cys3-Cys10。本研究首先采用N-9-芴甲氧羰基(Fmoc)固相合成法合成了B8.1T线性肽。根据采用半胱氨酸保护基团的不同，探索了3种不同的氧化方法：(1)两步氧化法；(2)one-pot方法；(3)自由氧化法。同时对提高芋螺毒素氧化折叠效率的条件进行了优化，对B8.1T的生物活性进行了初步的研究。结果表明，3种方法都可合成止确折叠的芋螺毒素B8.1T，其中两步氧化法和one-pot法合成效率高于自由氧化法，自由氧化折叠条件的优化表明，折叠反应添加物等能提高正确折叠产物的积累效率。B8.1T的动物活性实验显示，当对小鼠进行颅内给药时，对其行为活动产生抑制效应，而对肌肉给药的金鱼无明显影响。