铜绿假单胞菌OprD2基因突变及表达量改变与碳青霉烯类耐药的关系

摘要

目的：研究铜绿假单胞菌外膜通道蛋白OprD2蛋白的表达减弱或缺失，以及OprD2蛋白自身突变是否会影响铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药性。rn 方法：收集分离自临床的对亚胺培南(IPM)的MIC值22≥8ug/ml铜绿假单胞菌共101株，采用肉汤稀释法检测菌株对比阿培南(BPM)、美罗培南(MEM)、帕尼培南(PEM)的MIC值;用荧光定量RT-PCR检测铜绿假单胞菌膜通道蛋白OprD2基因的表达量情况;针对OprD2相对表达量正常，并对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌，采用普通PCR的方法扩增OprD2全长基因并测序。rn 结果：根据铜绿假胞菌的OprD2蛋白相对表达量结果，将101株铜绿假单胞菌分成两组，Group1为OprD2相对表达量降低组;Group2为OprD2相对表达量正常组;Group1中与Group2相比，对IPM、BPM、PEM、MEM的MIC值≥16ug/ml的菌株比例均有统计学差异(P＜0.01或0.05)。Group1中，28株同时对四种药物的MIC都≥16ug/ml，其中有25株的OprD2的相对表达量明显减低(＜0.4);外膜孔蛋白OprD2转录水平与四种碳青霉烯类药物MICs之间呈负相关趋势。Group2中，有16株OprD2基因发生突变，按照突变的类型主要分成四组;与PAO1相比，这些菌株对IPM、BPM、MEM、PEM的MIC值有不同程度的增加。rn 结论：OprD2外膜蛋白的表达量减少或缺失是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要机制，可能也与其它三种碳青霉烯药物耐药有密切关系;铜绿假单胞菌的OprD2基因发生突变，可能会降低铜绿假单胞菌对这几种碳青霉烯类药物的敏感性。