温郁金醚提物中二萜类化合物C抑制人结肠腺癌细胞及其与MAPK信号转导通路间关系的实验研究

摘要

目的：研究温郁金醚提物中二萜类化合物C体外对人结肠腺癌SW620细胞的抑制作用及其与MAPK信号通路间的关系。rn 方法：以含10％胎牛血清的Leibovitz’s L-15为培养基，置37℃、体积分数为5％的CO2培养箱中培养SW620细胞；将温郁金醚提物中二萜类化合物C溶于二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide，DMSO)，配成10mg/mL母液；以5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)和奥沙利铂(Oxaliplatin，L-OHP)为阳性对照药物，采用噻唑蓝(MTT)还原法检测三种药物在10～70μg/mL浓度时对SW620细胞增殖的影响；用倒置相差显微镜观察化合物C在0，40，55，70μg/mL浓度、48h时对SW620细胞的作用效果；用流式细胞仪检测化合物C在0，40，55，70μg/mL浓度对SW620细胞周期分布的影响及其凋亡率；用Western blot法检测化合物C在0，40，55，70μg/mL浓度、48h时对SW620细胞中ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、p38、p-p38表达的影响。rn 结果：MTT法显示化合物C能以时间-浓度依赖性方式抑制SW620细胞的增殖，与阳性对照组相比差异有统计学意义，其最高抑制率达95.302±1.482％(p＜0.01)；倒置相差显微镜下观察发现化合物C作用后的细胞呈典型的凋亡改变；流式细胞术(flow cytometry，FCM)显示化合物C能阻滞SW620细胞于G0/G1和S期，减少G2/M的比例，并诱导细胞凋亡，其最高凋亡率达98.20±0.910％；Western blot法显示化合物C对SW620细胞中ERK、JNK、p38及其相应磷酸化产物均有浓度依赖性的抑制作用，且三者磷酸化产物的抑制程度更高。rn 结论：温郁金醚提物中二萜类化合物C对人结肠腺癌SW620细胞的增殖有显著的抑制作用，阻滞其细胞周期，诱导细胞凋亡，并抑制MAPK通路中关键蛋白的表达与活化，是温郁金二萜类化合物C发挥抗肿瘤作用的机制之一。