超声辅助提取-快速分离液相色谱-串联质谱(多反应监控)同时测定丹参中的丹酚酸B和丹参酮ⅡA

摘要

丹参的化学成分主要有脂溶性的二萜醒类和水溶性的酚酸类，药典采用HPLC-UV法分别检测脂溶性的丹参酮ⅡA和水溶性的丹酚酸B作为丹参质量评价依据，并对这两种成分采用了不同的提取方法，操作复杂。而同时检测两种成分的HPLC-UV方法需要很高的色谱分离度，否则由于其他成分的干扰会大大降低目标化合物分析的选择性。本研究采用两步超声辅助提取法，实现同时完全提取丹酚酸B和丹参酮ⅡA，并建立同时测定该两种成分的RRLC-MS/MS分析方法。按照优化的色谱、质谱条件，在标准品浓度范围内得到二者的标准曲线:丹酚酸B为y=408.3586x+124.4357(R=0.9996)，丹参酮ⅡA为y=458.3655x+142.6253(R=0.999 8)，线性良好。按信噪比3:1，丹酚酸B和丹参酮ⅡA检出限分别为1.2,0.8μg/L(进样5μL)。按信噪比10:1，丹酚酸B和丹参酮ⅡA定量分别为4.0,2.8μg/L(进样5μL)。将过滤的样品溶液用甲醇稀释，使其浓度在线性定量范围中间部位，采用上述建立的分析方法，连续进样5次取平均值，得到丹参中丹酚酸B含量为53.5 mg/g (RSD=3.2%)，丹参酮ⅡA含量为8.7 mg/g(RSD=3.6%)。采用标准加入法测定超声辅助提取-RRLC-MS/MS测定丹酚酸B和丹参酮ⅡA的回收率分别为97.6%和92.8%(n=3)。