穿孔膜片钳方法记录L型钙通道及脱氢紫堇碱对其影响的研究

摘要

目的：比较全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录大鼠心室肌细胞L型钙通道电流随时间经过的变化差异，并观察脱氢紫堇碱对L型钙通道的影响。方法：采用全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录急性分离的大鼠心室肌细胞L型钙通道电流。结果：采用全细胞膜片钳法记录到的L型钙通道电流峰值在15分钟内衰减了34+23％(n=10)，采用穿孔膜片钳方法记录到的L型钙通道电流峰值15分钟内仅衰减了2.7±3.4％(n=9)；采用穿孔膜片钳方法能够记录到人参皂苷Re(100μmol.L-1)的抑制效应，而采用全细胞膜片钳方法产生的电流衰减几乎完全掩盖了人参皂苷Re的效应。脱氢紫堇碱(10,100μmmol·L-1)能够抑制L型钙通道的电流峰值，抑制率分别为97±5％(n=5)；28.6±8.5％(n=5).结论：穿孔膜片钳方法较全细胞膜片钳方法在对L型钙通道电流记录方面更具稳定性和准确性，脱氢紫堇碱能够浓度依赖性的抑制L型钙通道。