肾移植术后受者PBMCs中TNF-α mRNA的表达

摘要

目的：讨论其能否作为肾移植术后免疫状态的评估指标，辅助指导临床用药。rn 方法：1材料收集2009年4月至2009年8月郑州大学第一附属医院门诊及住院肾移植术后43例患者外周血，均为首次肾移植。其中男26例，女17例。肾移植术后常规应用环孢素(CsA)+骁悉(MMF)+强的松。其中包括肾移植术后稳定患者（稳定组，18例）、肾移植术后发生感染患者（感染组，14例）和肾移植术后排斥患者（排斥组，11例）。以健康体检者15人作为健康对照组，其中男10例，女5例。2试验方法：(1)抽静脉血分离单个核细胞。(2)半定量RT-PCR检测TNF-α基因mRNA表达，琼脂糖凝胶电泳，UVP凝胶图像分析仪。分析扫描各条带，以β-actin基因作为内参照，测定目的基因相对表达量。3统计学分析：所有数据采用SPSS17.0数据包进行分析，TNF-α的表达水平用表示。各组间TNF-α的表达水平经方差齐性检验后，采用单因素方差分析，组间两两比较采用Bonferroni法检验。检验水准α=0.05。rn 结果:RT-PCR分析结果显示不同组肾移植患者单个核细胞TNF-α扩增产物为299 bp，人β-actin为内参，扩增产物为466 bp。感染组、排斥组TNF-α的表达水平高于稳定组，健康对照组低于稳定组。与稳定组相比，感染组和排斥组的差异有统计学意义(P<0.05)，而健康对照组与稳定组相比，无统计学差异(P>0.05)。rn 结论：肾移植术后当发生急性排异、感染导致体内免疫功能增强时，患者TNF-αmRNA的表达水平升高。Van Riemsdijk等认为移植术后的感染和恶性肿瘤的高发生率不单纯是一个免疫抑制剂的使用问题，而是内源性细胞因子失衡损伤了机体的免疫能力，其中TNF-α就是重要的因素之一。检测TNF-α和IL-10的基因型有助于设计切实可行的免疫抑制治疗方案。因此，TNF-α可以作为移植术后受者免疫状态的检测指标。