罗格列酮早期干预对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠MMP-2、MMP-9及TIMP-1表达的影响

摘要

目的:1.观察罗格列酮早期干预对野百合碱(MCT)诱导动脉型肺动脉高压(PAH)大鼠肺组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响。2.观察罗格列酮早期干预对MCT诱导PAH大鼠肺组织MMP-2、MMP-9和TIMP—1的表达及MMP-2、MMP-9活性的影响，初步探讨罗格列酮对PH的作用机制。方法:1.实验动物分组：雄性Sprague—Dawley大鼠32只，随机分为4组，每组8只：①对照组(N组)：颈背部皮下注射生理盐水1次；②PAH模型组(M组)：颈背部皮下注射野百合碱(60mg／kg)1次，并于注射当天(第0天)开始给予等体积生理盐水(约1.5ml／d)连续灌胃21天；③罗格列酮高剂量干预PAH组(MRH组)：野百合碱(60mg／kg)颈背部皮下注射1次，并于注射当天(第0天)开始给予罗格列酮(每日5mg／kg)连续灌胃21天；④罗格列酮低剂量干预PAH组(MRL组)：野百合碱(60mg／kg)颈背部皮下注射1次，并于注射当天(第0天)开始给予罗格列酮(每日2.5mg／kg)连续灌胃21天。2.于第21天处死动物，留取肺组织。肺组织切片行PPARγ、MMP-2和MMP-9免疫组化染色，观察PPARγ、MMP-2和MMP-9在大鼠肺组织的定位表达情况。结果:1.罗格列酮早期干预对MCT诱导PAH大鼠肺组织PPARγ表达的影响免疫组化染色下，PPARγ阳性细胞主要分布于肺血管内膜，表现为细胞浆及细胞核染成棕黄色。N组大鼠肺小动脉内膜PPARγ部分表达，M组大鼠肺小动脉内膜PPARγ表达量降低，MRH组及MRL组大鼠肺小动脉内膜PPARγ表达量增高。2.罗格列酮早期干预对MCT诱导PAH大鼠肺组织MMP-2, MMP-9及TIMP-1表达的影响免疫组化染色下，MMP-2, MMP-9阳性细胞主要分布于肺血管壁的内膜、外膜(中膜少量)，表现为细胞浆呈棕黄色。M组大鼠肺小动脉MMP-2, MMP-9表达量较N组大鼠升高，MRH组及MRL组大鼠肺小动脉MMP-2, MMP-9表达量较M组降低。结论:1.野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺组织PPARγmRNA表达下降，罗格列酮可激活PPARγ而发挥肺血管保护作用，此效应与剂量有关。2.罗格列酮早期干预可降低野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺组织MMP-2, MMP-9及TIMP-1的mRNA表达水平，此效应与剂量有关。3.罗格列酮早期干预可降低野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺组织MMP-9的活性(而非MMP-2)，此效应与剂量有关。这提示罗格列酮可能主要通过调节MMP-9的活性，改善细胞外基质重构而发挥肺血管保护作用。