不同时间深低温保存对胸骨组织活性的影响

摘要

目的：探讨不同时间深低温保存对胸骨组织活力的影响。方法：切取SD大鼠胸骨后立即放入含有低钾右旋糖酐(LPD)冻存液的冻存管,在程序降温仪降至-80℃后投入液氮,分别保存1d、15d、30d、60d、120d后对胸骨组织进行体外培养,加入3H-TdR以做标记,使用β液体闪烁计数器检测组织细胞吸收情况和培养上清中的碱性磷酸酶(ALP)活性。结果：与冷冻前比较,低温保存1d后胸骨组织培养上清中ALP活性开始降低,15d降至最低,以后基本保持稳定。低温保存1d后,3H-TdR掺入率降至90.02％。冷冻15d以后3H-TdR掺入率降至73.9％,以后无明显变化。结论：深低温保存后胸骨组织保留70％～80％的活力,损伤主要发生在冷冻早期,采用ALP活性检测和3H-TdR体外组织培养是测定胸骨组织活力的有效方法。