抑制TREK-1分子对七氟醚预处理诱导神经保护作用影响的离体研究

摘要

目的：体外细胞培养并抑制TREK-1蛋白表达，明确TREK-1蛋白表达在七氟醚预处理的神经保护中的作用。方法：(1)人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)诱导分化鉴定：①诱导分化1天组，细胞培养液中加入视黄酸(10uM)诱导分化为类神经元，1天后进行细胞爬片和细胞蛋白提取。②诱导分化4天组，细胞培养液中加入视黄酸(10uM)连续4天诱导分化为类神经元，第4天进行细胞爬片和细胞蛋白提取。③诱导分化7天组，细胞培养液中加入视黄酸(10uM)连续7天诱导分化为类神经元，第7天进行细胞爬片和细胞蛋白提取。④诱导分化10天组，细胞培养液中加入视黄酸(10uM)连续10天诱导分化为类神经元，第10天进行细胞爬片和细胞蛋白提取。结果:诱导分化:Western-blot和免疫荧光结果均显示神经元特异性核蛋白NeuN以及神经元骨架蛋白βⅢ-Tublin诱导分化7天组表达最强(P＜0.05 ) ,因此确定诱导分化的时间为7天。结论:细胞水平证实抑制TREK-1蛋白表达逆转了七氟醚预处理的神经保护作用，说明TREK-1介导了七氟醚预处理诱导的神经保护作用。