痘苗病毒滴度测定国家标准品的研制

摘要

目的:研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。rn 方法:制备一份痘病毒母液, 加入保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室，按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定，每次实验稀释2个稀释度，每个稀释度平行5孔，对标准品中痘病毒滴度进行赋值，对标准品进行分装重量精度、装量、外观、pH值、无菌试验等检测，并考核稳定性。rn 结果:利用 CEF细胞培养制备了一份大量的痘苗病毒标准品，分装重量精度为2.5%;装量检查合格：1ml/支； pH值为6.9；无菌试验合格；经过4个实验室的52次测定，病毒滴度的几何均数6.45，标准差为 0.27,总变异系数4.15%。95%的可信区间为：5.93-6.98。病毒滴度为2.82×106PFUml-1，95%可信区间为：8.51×105-9.55×106 PFUml-1。-20℃放置1年滴度无变化，2-8℃可稳定性放置10d， 37℃稳定性差，2d即开始滴度明显下降。rn 结论:该痘病毒标准品符合要求，可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。