巴戟天糖链对分子搭桥中TRPC6通道及血管生成基因谱的影响

摘要

目的：观察巴戟天糖链(MOO)促进人脐静脉内皮细胞(ECV304)增殖中对其下游瞬时受体电位蛋白C家族中TRPC6通道蛋白信号转导的影响和血管生成基因谱的作用，以探讨MOO促分子搭桥的药理作用机制。方法：对正常传代生长3～8代的ECV304细胞进行缺氧1h、复氧2h处理，将细胞分为：正常培养组，缺/复氧模型组(H/R)，H/R+阳性药物组，H/R+MOO小(50mg·L-1)、中(150mg·L-1)、大(450mg·L-1)剂量组后给予不同剂量药物干预24h～48h，用倒置显微镜观察其生长状态后，①加入Trizol试剂，并反复吹打使细胞均匀后，进行内皮细胞血管生成基因芯片(Endothelial Cell BiologyMicroarray)检测各组血管生成基因mRNA表达情况；②提取各组细胞蛋白用蛋白印记法(Western-blot)检测各药物组TRPC6表达情况。结论:1. MOO可剂量依赖性的提高细胞内TRPC6蛋白的表达及TRPC6信号通路中多种促血管生成基因mRNA的表达。2. MOO促进分子搭桥的作用机制与其促进TRPC通道信号转导，提高TRPC6蛋白表达有关。