犹他游动放线菌中酰胺水解酶基因拷贝数增加对转化ECB效率的影响

摘要

目的：利用ΦC31整合酶介导的位点特异性重组方法，构建棘白菌素B酰胺水解酶基因拷贝数增加的犹他游动放线菌重组菌株。方法：构建含有棘白菌素B酰胺水解酶基因的基因整合型质粒pYGCQ-03-13,通过属间接合转移的方法将该基因片段转入犹他游动放线菌SIPI-T2001中；利用静息细胞转化法,考察其对转化效率的影响。结果：筛选得到的阳性重组菌株SIPI-GE.T2001,对棘白菌素B的转化效率最高达到61.7％。结论：增加棘白菌素B酰胺水解酶基因拷贝数,有效地提高了犹他游动放线菌对棘白菌素B的转化效率。