NF-κB信号通路

摘要： 背景:研究发现,淫羊藿苷可促进小鼠前成骨细胞增殖分化。核因子κB信号通路和细胞自噬在成骨细胞分化调节中发挥重要作用,两者是否参与调节淫羊藿苷对小鼠前成骨细胞增殖分化的影响尚不清楚。目的:探讨淫羊藿苷对小鼠前成骨细胞增殖分化的影响以及核因子κB信号通路和细胞自噬在其中的作用。方法:①筛选出淫羊藿苷的最佳干预浓度:将小鼠前成骨细胞MC3T3-E1细胞分为空白对照组及不同浓度(0.01,0.1,1,10,100μmol/L)的淫羊藿苷组,MTS检测淫羊藿苷干预后各组小鼠前成骨细胞增殖活性;茜素红染色评估成骨分化水平;Western blot检测淫羊藿苷干预后各组小鼠前成骨细胞成骨分化能力和自噬活性;②加入3-甲基腺嘌呤抑制自噬:实验设置4组,对照组、3-甲基腺嘌呤组、淫羊藿苷组、3-甲基腺嘌呤+淫羊藿苷组,茜素红染色观察细胞矿化结节;Western blot检测细胞碱性磷酸酶、Runx2、p62、LC3、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白的表达情况。结果与结论:①淫羊藿苷能促进小鼠前成骨细胞增殖,浓度为10μmol/L时效果最明显(P<0.05);10μmol/L淫羊藿苷组矿化结节形成明显多于空白对照组,碱性磷酸酶、Runx2蛋白表达显著增加(P<0.05);与空白对照组相比,10μmol/L淫羊藿苷组Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达显著增加,p62表达减少(P<0.05);②予3-甲基腺嘌呤抑制自噬后,与淫羊藿苷组相比,3-甲基腺嘌呤+淫羊藿苷组碱性磷酸酶、Runx2、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达减少,p62表达增加(P<0.05);③与对照组相比,淫羊藿苷组p-p65/p65表达减少(P<0.05);④结果提示,淫羊藿苷可能通过抑制核因子κB信号通路和增强自噬促进MC3T3-E1细胞成骨分化。

摘要： 背景:研究发现,淫羊藿苷可促进小鼠前成骨细胞增殖分化.核因子κB信号通路和细胞自噬在成骨细胞分化调节中发挥重要作用,两者是否参与调节淫羊藿苷对小鼠前成骨细胞增殖分化的影响尚不清楚.目的:探讨淫羊藿苷对小鼠前成骨细胞增殖分化的影响以及核因子κB信号通路和细胞自噬在其中的作用.方法:①筛选出淫羊藿苷的最佳干预浓度:将小鼠前成骨细胞MC3T3-E1细胞分为空白对照组及不同浓度(0.01,0.1,1,10,100 μmol/L)的淫羊藿苷组,MTS检测淫羊藿苷干预后各组小鼠前成骨细胞增殖活性;茜素红染色评估成骨分化水平;Western blot检测淫羊藿苷干预后各组小鼠前成骨细胞成骨分化能力和自噬活性;②加入3-甲基腺嘌呤抑制自噬:实验设置4组,对照组、3-甲基腺嘌呤组、淫羊藿苷组、3-甲基腺嘌呤+淫羊藿苷组,茜素红染色观察细胞矿化结节;Western blot检测细胞碱性磷酸酶、Runx2、p62、LC3、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白的表达情况.结果与结论:①淫羊藿苷能促进小鼠前成骨细胞增殖,浓度为10 μmol/L时效果最明显(P ＜ 0.05);10 μmol/L淫羊藿苷组矿化结节形成明显多于空白对照组,碱性磷酸酶、Runx2蛋白表达显著增加(P ＜ 0.05);与空白对照组相比,10 μmol/L淫羊藿苷组Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达显著增加,p62表达减少(P ＜ 0.05);②予3-甲基腺嘌呤抑制自噬后,与淫羊藿苷组相比,3-甲基腺嘌呤+淫羊藿苷组碱性磷酸酶、Runx2、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达减少,p62表达增加(P ＜ 0.05);③与对照组相比,淫羊藿苷组p-p65/p65表达减少(P ＜ 0.05);④结果提示,淫羊藿苷可能通过抑制核因子κB信号通路和增强自噬促进MC3T3-E1细胞成骨分化.

摘要： 随着人口老龄化的日益加剧,椎间盘退行性变造成的下腰痛已经成为严重的医疗和社会问题。基础研究表明,椎间盘退行性变的本质不仅是基质合成和分解代谢过程之间的失衡,还有炎症反应的不断进行。而这两种生物学进程均需特定的信号通路介导,特别是核因子-κB(NF-κB)介导的通路。目前NF-κB通路已经被认为是一些肌肉骨骼疾病中炎症和分解代谢的主要调节通路。越来越多的研究表明该信号通路在椎间盘退行性变中的重要性。本文从椎间盘退行性变中NF-κB的激活因素和NF-κB的靶基因为切入点,总结并阐明了NF-κB通路在椎间盘退行行性变中的作用。

摘要： 目的:研究白及胶/微米三七膏含药血清通过核因子(NF)-κB信号通路对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症损伤模型的影响。方法:取对数生长期的RAW264.7细胞,用不同浓度(5、10、15、20、25μg/mL)的LPS处理,采用CCK-8法检测细胞增殖率,确定LPS的最佳浓度,并诱导建立RAW264.7细胞炎症损伤模型;将细胞分为正常对照组、LPS组和不同浓度梯度(50、100、150、200、250、300μL/mL)的白及胶/微米三七膏含药血清+LPS组,用CCK-8法检测各组光密度(OD)值,确定含药血清最佳使用浓度;将细胞分为正常对照组、空白血清组、含药血清组、LPS组、LPS+空白血清组和LPS+含药血清组,用Western blotting法测定细胞浆/细胞核NF-κB p65蛋白表达量和细胞浆p-IκBα蛋白表达量。结果:LPS最佳浓度为10μg/mL;白及胶/微米三七膏含药血清最佳浓度为250μL/mL;与正常对照组相比,LPS组细胞浆NF-κB p65蛋白表达量显著降低、细胞核NF-κB p65和细胞浆p-IκBα蛋白表达量显著增高,差异有统计学意义(P<0.01);与LPS组相比,LPS+含药血清组细胞浆NF-κB p65蛋白表达量显著增高、细胞核NF-κB p65和细胞浆p-IκBα蛋白表达量显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:通过NF-κB信号通路,白及胶/微米三七膏含药血清通过抑制NF-κB p65进入细胞核和抑制I-κBα的磷酸化,减少巨噬细胞分泌炎性因子,从而改善LPS诱导的炎症反应。

摘要： 为丰富蒙古马NF-κB信号通路的研究内容,为蒙古马机体固有免疫调控的研究奠定理论基础,本研究采用实时荧光定量PCR和Western Blot方法,分析蒙古马肝脏、脾脏、肺脏和血液组织中NF-κB信号通路上7个基因的表达情况。结果表明,7个基因在4个组织中均有表达,但存在差异。NF-κB p50、IL-1β和NFKBIA基因在肺脏中的表达显著高于在肝脏、脾脏和血液中的表达,PTGS2基因在肺脏中的表达显著高于在肝脏中的表达。NF-κB p65蛋白在脾脏中表达较高,其次在肝脏、血液、肺脏;IL-1β蛋白在4个组织中的表达量依次为肺脏、脾脏、肝脏和血液。本实验结果为进一步研究NF-κB信号通路对蒙古马免疫调控的作用提供数据支持。

摘要： 用酶联免疫法检测柴胡口服液作用下5 d和10 d热应激肉鸡血清中炎性因子的表达,用蛋白免疫印迹法检测肉鸡肺脏中炎症相关因子(NF-κB p65、NLRP3、IL-1β、IL-6和TNF-α)蛋白表达,并观察肺脏病理切片。发现慢性热应激5 d与10 d显著提高了肉鸡血清中促炎因子IL-1β和IL-6、TNF-α的含量,肉鸡出现肺泡结构损伤、充血等病理变化,而柴胡口服液能明显降低第5天血清中促炎因子IL-1β的含量,降低第10天血清中IL-6和TNF-α的水平,改善肺组织病理损伤,并能显著下调肺组织炎性因子NF-κB p65、NLRP3、IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白表达水平。说明慢性热应激可诱导肉鸡肺脏炎性损伤,柴胡口服液可通过下调NF-κB-NLRP3信号通路抑制炎性因子蛋白表达,从而缓解热应激诱导的肺损伤。

摘要： 目的:研究急性热应激对睾丸免疫微环境相关蛋白的影响。方法:49只雄性SD大鼠随机分为对照组和热应激组(0.5 h组、2 h组、4 h组、6 h组、24 h组和48 h组)。热应激组大鼠麻醉后43°C恒温水浴20 min,并分别于0.5 h、2 h、4 h、6 h、24 h和48 h后摘取睾丸。Western blot检测睾丸内occludin、ZO-1、vimentin、p-NF-κB p65和p-IκBα的表达;ELISA法检测睾丸内IL-1β表达。结果:与对照组相比,热应激组vimentin和occludin表达均显著降低(P0.05),其余热应激组ZO-1表达显著降低(P0.05),6 h组、24 h组和48 h组p-NF-κB p65和p-IκBα表达显著升高(P0.05)。结论:急性热应激0.5 h后,细胞骨架结构和血睾屏障紧密连接结构即出现异常,且在48 h内损伤逐渐加重。睾丸内炎症相关NF-κB信号通路激活则发生在6 h以后,但并未导致睾丸内炎症因子增加,表明急性热应激可破坏睾丸免疫豁免结构,激活NF-κB信号通路,却不能诱发局部炎症反应。

摘要： 目的探讨骨保护素(OPG)对间歇性循环牵张力(ICMT)加力诱导下退变的关节软骨细胞保护作用的机制。方法获取大鼠膝关节软骨细胞,传代至P2代进行实验,对细胞用FX-5000TM细胞体外力学刺激装置进行力学刺激,建立关节软骨细胞体外退变模型。P2代软骨细胞随机分为对照组、ICMT 3 d组(在与对照组相同培养条件下对细胞进行8%压强的ICMT,0.5 Hz,10 h/d,加力3 d)、OPG组(在细胞培养液中加入一定浓度的OPG培养细胞)、ICMT 3 d+OPG组(对用含有OPG的细胞培养液培养的细胞进行加力3 d)。培养3 d后收集各组细胞,应用倒置相差光学显微镜观察关节软骨细胞的表型变化,甲苯胺蓝染色法观察细胞表面形态,四噻唑蓝法检测不同浓度OPG和不同ICMT作用时间下关节软骨细胞存活率的变化。RT-PCR法检测各组关节软骨细胞中二型胶原、蛋白聚糖、SRY相关高迁移率族盒蛋白9(SOX-9)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)mRNA表达水平,Western blot法检测各组关节软骨细胞中NF-κB信号通路相关蛋白MMP-13、p65、磷酸化p65(p-p65)蛋白表达水平。结果与对照组比较,ICMT 3 d组细胞发生梭形改变,细胞外基质减少;ICMT 3 d+20 ng OPG组细胞形态变化不明显,细胞外基质的丢失得到改善。ICMT 1 d组、ICMT 2 d组、ICMT 3 d组、5 ng OPG组、10 ng OPG组和20 ng OPG组与对照组关节软骨细胞存活率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。与对照组比较,ICMT 1 d组、ICMT 3 d组细胞中二型胶原、蛋白聚糖、SOX-9 mRNA表达水平均下降,ICMT 3 d组细胞中MMP-13 mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与ICMT 3 d组比较,ICMT 3 d+10 ng OPG组细胞中二型胶原、SOX-9 mRNA表达水平均升高,ICMT 3 d+20 ng OPG组细胞中二型胶原、蛋白聚糖、SOX-9 mRNA表达水平均升高,ICMT 3 d+10 ng OPG组、ICMT 3 d+20 ng OPG组细胞中MMP-13 mRNA表达水平均下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与ICMT 3 d组比较,ICMT 3 d+5 ng OPG组、ICMT 3 d+10 ng OPG组、ICMT 3 d+20 ng OPG组MMP-13蛋白表达水平均下降(均P<0.05)。与ICMT 3 d组比较,ICMT 3 d+10 ng OPG组、ICMT 3 d+20 ng OPG组中p-p65蛋白表达水平均下降(均P<0.05)。结论OPG通过影响NF-κB信号通路可以抑制大鼠膝关节软骨细胞的退变,从而起到保护关节软骨的作用。

摘要： 目的:探讨IKKβ和NF-κB p65缺失对小鼠成骨细胞分化的影响。方法:使用CRISPR/Cas9基因编辑工具分别敲除小鼠前成骨细胞MC3T3-E1中的Ikbkb或Rela基因,获得不表达IKKβ或NF-κB p65蛋白的Ikbkb^(-/-)MC3T3-E1和Rela^(-/-)MC3T3-E1细胞。用10 mmol/Lβ-甘油磷酸+50 mg/L抗坏血酸诱导MC3T3-E1、Ikbkb^(-/-)MC3T3-E1、Rela^(-/-)MC3T3-E1细胞成骨分化。诱导培养4 d后,qPCR法检测细胞中成骨分化标志性基因Sp7、Alpl、Spp1、Bglap mRNA的表达,Western blot法检测细胞中成骨分化相关蛋白ALPL、FZD9的表达;16 d后,茜素红染色法检测细胞外基质矿化水平。结果:诱导培养后Ikbkb^(-/-)MC3T3-E1细胞中Sp7、Alpl、Bglap mRNA表达以及ALPL、FZD9蛋白表达高于MC3T3-E1细胞和Rela^(-/-)MC3T3-E1细胞(P0.05)。结论:IKKβ缺失与NF-κB p65缺失在成骨细胞分化过程中的功能可能不同,IKKβ缺失促进成骨细胞分化,而NF-κB p65缺失则无此作用。

摘要： 目的 观察蝉龙汤对PM2.5暴露下哮喘小鼠肺损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法 将54只健康SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组(A组)和造模组,采用卵清白蛋白(Ovalbumin, OVA)诱导哮喘小鼠模型,造模成功后,将造模组小鼠随机分为模型组(B组)、PM2.5+模型组(C组)、模型+中药组(D组)、PM2.5+模型+中药组(E组),C组、E组每日PM2.5染毒6 h。A、B、C组每日予蒸馏水灌胃,D、E组每日予中药灌胃,连续4周。HE染色观察小鼠肺组织病理改变情况;Flexi Vent动物肺功能仪检测小鼠肺功能;ELISA法测定小鼠肺组织中白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)以及核因子-κB(Nuclear Factor kappa-B,NF-κB)水平;化学法检测肺组织内超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-Px)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)的活性;流式细胞术检测肺组织内活性氧(Reactive oxygen species, ROS)的水平。结果 除A组外其余四组均出现不同程度的肺泡间隔增厚,炎性细胞浸润,肺泡腔不规则;C组病理改变最为明显,中药干预后的D、E组与B、C组分别相比病理损伤有所缓解。与B组比较,D组小鼠最大呼气流量(Peak expiratory flow, PEF)升高(P<0.05);与C组比较,E组小鼠PEF升高(P<0.05)。与B组比较,D组小鼠IL-1β和NF-κB的表达下降(P<0.05);与C组比较,E组小鼠IL-6、IL-8、IL-1β水平下降,IL-10表达增加(P<0.05)。与B组比较,D组小鼠MDA含量减少(P<0.05);与C组比较,E组MDA含量减少(P<0.05),CAT、GSH-PX活性增加(P<0.05)。与C组比较,E组ROS水平下降(P<0.05)。结论 蝉龙汤可减轻PM2.5暴露下哮喘小鼠肺损伤,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路及降低ROS表达有关。

摘要： 目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期大鼠骨骼肌瘦素的影响. 方法:SD大鼠60只随机分为对照组、模型组、补肺健脾组、PDTC组、补肺健脾+PDTC组和氨茶碱组,采用香烟熏吸联合细菌感染法制作COPD稳定期模型.于第9～20周分别给予相应药物.观察大鼠体重、体重指数的变化,并采用Western blot和ELISA技术观察股四头肌、肱二头肌、肋间肌和比目鱼肌核因子(NF)-κB磷酸化水平及瘦素(LEP)水平. 结果:模型组大鼠体重、体重指数均较对照组显著降低(P＜0.05或P＜0.01),治疗组体重和体重指数均有不同程度地升高,其中补肺健脾组联合PDTC组改善明显;模型组四种肌肉NF-κB、瘦素水平均较对照组显著升高(P＜0.01),补肺健脾方可显著改善上述指标(P＜0.05或P＜0.01),其中补肺健脾+PDTC组改善明显(P＜0.01),疗效优于氨茶碱. 结论:补肺健脾方可以显著改善COPD大鼠骨骼肌萎缩,其机制可能与下调NF-κB活性,降低LEP有关.

摘要： 目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期大鼠骨骼肌瘦素的影响. 方法:SD大鼠60只随机分为对照组、模型组、补肺健脾组、PDTC组、补肺健脾+PDTC组和氨茶碱组,采用香烟熏吸联合细菌感染法制作COPD稳定期模型.于第9～20周分别给予相应药物.观察大鼠体重、体重指数的变化,并采用Western blot和ELISA技术观察股四头肌、肱二头肌、肋间肌和比目鱼肌核因子(NF)-κB磷酸化水平及瘦素(LEP)水平. 结果:模型组大鼠体重、体重指数均较对照组显著降低(P＜0.05或P＜0.01),治疗组体重和体重指数均有不同程度地升高,其中补肺健脾组联合PDTC组改善明显;模型组四种肌肉NF-κB、瘦素水平均较对照组显著升高(P＜0.01),补肺健脾方可显著改善上述指标(P＜0.05或P＜0.01),其中补肺健脾+PDTC组改善明显(P＜0.01),疗效优于氨茶碱. 结论:补肺健脾方可以显著改善COPD大鼠骨骼肌萎缩,其机制可能与下调NF-κB活性,降低LEP有关.

摘要： 目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期大鼠骨骼肌瘦素的影响. 方法:SD大鼠60只随机分为对照组、模型组、补肺健脾组、PDTC组、补肺健脾+PDTC组和氨茶碱组,采用香烟熏吸联合细菌感染法制作COPD稳定期模型.于第9～20周分别给予相应药物.观察大鼠体重、体重指数的变化,并采用Western blot和ELISA技术观察股四头肌、肱二头肌、肋间肌和比目鱼肌核因子(NF)-κB磷酸化水平及瘦素(LEP)水平. 结果:模型组大鼠体重、体重指数均较对照组显著降低(P＜0.05或P＜0.01),治疗组体重和体重指数均有不同程度地升高,其中补肺健脾组联合PDTC组改善明显;模型组四种肌肉NF-κB、瘦素水平均较对照组显著升高(P＜0.01),补肺健脾方可显著改善上述指标(P＜0.05或P＜0.01),其中补肺健脾+PDTC组改善明显(P＜0.01),疗效优于氨茶碱. 结论:补肺健脾方可以显著改善COPD大鼠骨骼肌萎缩,其机制可能与下调NF-κB活性,降低LEP有关.

摘要： 目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期大鼠骨骼肌瘦素的影响. 方法:SD大鼠60只随机分为对照组、模型组、补肺健脾组、PDTC组、补肺健脾+PDTC组和氨茶碱组,采用香烟熏吸联合细菌感染法制作COPD稳定期模型.于第9～20周分别给予相应药物.观察大鼠体重、体重指数的变化,并采用Western blot和ELISA技术观察股四头肌、肱二头肌、肋间肌和比目鱼肌核因子(NF)-κB磷酸化水平及瘦素(LEP)水平. 结果:模型组大鼠体重、体重指数均较对照组显著降低(P＜0.05或P＜0.01),治疗组体重和体重指数均有不同程度地升高,其中补肺健脾组联合PDTC组改善明显;模型组四种肌肉NF-κB、瘦素水平均较对照组显著升高(P＜0.01),补肺健脾方可显著改善上述指标(P＜0.05或P＜0.01),其中补肺健脾+PDTC组改善明显(P＜0.01),疗效优于氨茶碱. 结论:补肺健脾方可以显著改善COPD大鼠骨骼肌萎缩,其机制可能与下调NF-κB活性,降低LEP有关.

摘要： 目的：探讨茅莓总皂苷(TSRP)调控K562/A02细胞NF-κB信号通路对mdr-1和survivin基因表达的影响,为逆转耐药提供依据. 方法：MTT法观察不同浓度TSRP对K562/A02细胞的抑制增殖作用;Annexin V-FITC/PI法检测不同浓度TSRP诱导K562/A02细胞凋亡;RT-PCR法检测不同浓度TSRP对mdr-1和survivin基因mRNA表达的影响;Western blot法检测不同浓度TSRP处理K562/A02细胞后NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα、PgP和survivin的表达. 结果：MTT显示TSRP在浓度200、400和800μg/ml范围内对K562/A02细胞生长抑制呈剂量依赖性,浓度400和800μg/ml时吸光度分别为0.57±0.03和0.37±0.01,与空白对照组0.83±0.05比较,P均＜0.05;Annexin V-FITC/PI细胞凋亡显示经不同浓度TSRP处理后,细胞的早期凋亡率明显增加;RT-PCR法检测到TSRP显著抑制细胞mdr-1和survivinmRNA表达,呈剂量依赖性;Western blot法显示TSRP显著抑制NF-κB/P65、NF-κB/P50和IκBα的活性,并且抑制P-gp和survivin表达,均呈剂量依赖性. 结论：TSRP通过NF-κB信号通路调控白血病K562/AO2细胞mdr-1和survivin基因表达,针对NF-κB信号途径研究开发抗白血病中药有效成分是中医药发展的一个方向.

摘要： 目的：探讨茅莓总皂苷(TSRP)调控K562/A02细胞NF-κB信号通路对mdr-1和survivin基因表达的影响,为逆转耐药提供依据. 方法：MTT法观察不同浓度TSRP对K562/A02细胞的抑制增殖作用;Annexin V-FITC/PI法检测不同浓度TSRP诱导K562/A02细胞凋亡;RT-PCR法检测不同浓度TSRP对mdr-1和survivin基因mRNA表达的影响;Western blot法检测不同浓度TSRP处理K562/A02细胞后NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα、PgP和survivin的表达. 结果：MTT显示TSRP在浓度200、400和800μg/ml范围内对K562/A02细胞生长抑制呈剂量依赖性,浓度400和800μg/ml时吸光度分别为0.57±0.03和0.37±0.01,与空白对照组0.83±0.05比较,P均＜0.05;Annexin V-FITC/PI细胞凋亡显示经不同浓度TSRP处理后,细胞的早期凋亡率明显增加;RT-PCR法检测到TSRP显著抑制细胞mdr-1和survivinmRNA表达,呈剂量依赖性;Western blot法显示TSRP显著抑制NF-κB/P65、NF-κB/P50和IκBα的活性,并且抑制P-gp和survivin表达,均呈剂量依赖性. 结论：TSRP通过NF-κB信号通路调控白血病K562/AO2细胞mdr-1和survivin基因表达,针对NF-κB信号途径研究开发抗白血病中药有效成分是中医药发展的一个方向.

摘要： 目的：探讨茅莓总皂苷(TSRP)调控K562/A02细胞NF-κB信号通路对mdr-1和survivin基因表达的影响,为逆转耐药提供依据. 方法：MTT法观察不同浓度TSRP对K562/A02细胞的抑制增殖作用;Annexin V-FITC/PI法检测不同浓度TSRP诱导K562/A02细胞凋亡;RT-PCR法检测不同浓度TSRP对mdr-1和survivin基因mRNA表达的影响;Western blot法检测不同浓度TSRP处理K562/A02细胞后NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα、PgP和survivin的表达. 结果：MTT显示TSRP在浓度200、400和800μg/ml范围内对K562/A02细胞生长抑制呈剂量依赖性,浓度400和800μg/ml时吸光度分别为0.57±0.03和0.37±0.01,与空白对照组0.83±0.05比较,P均＜0.05;Annexin V-FITC/PI细胞凋亡显示经不同浓度TSRP处理后,细胞的早期凋亡率明显增加;RT-PCR法检测到TSRP显著抑制细胞mdr-1和survivinmRNA表达,呈剂量依赖性;Western blot法显示TSRP显著抑制NF-κB/P65、NF-κB/P50和IκBα的活性,并且抑制P-gp和survivin表达,均呈剂量依赖性. 结论：TSRP通过NF-κB信号通路调控白血病K562/AO2细胞mdr-1和survivin基因表达,针对NF-κB信号途径研究开发抗白血病中药有效成分是中医药发展的一个方向.

摘要： 目的：探讨茅莓总皂苷(TSRP)调控K562/A02细胞NF-κB信号通路对mdr-1和survivin基因表达的影响,为逆转耐药提供依据. 方法：MTT法观察不同浓度TSRP对K562/A02细胞的抑制增殖作用;Annexin V-FITC/PI法检测不同浓度TSRP诱导K562/A02细胞凋亡;RT-PCR法检测不同浓度TSRP对mdr-1和survivin基因mRNA表达的影响;Western blot法检测不同浓度TSRP处理K562/A02细胞后NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα、PgP和survivin的表达. 结果：MTT显示TSRP在浓度200、400和800μg/ml范围内对K562/A02细胞生长抑制呈剂量依赖性,浓度400和800μg/ml时吸光度分别为0.57±0.03和0.37±0.01,与空白对照组0.83±0.05比较,P均＜0.05;Annexin V-FITC/PI细胞凋亡显示经不同浓度TSRP处理后,细胞的早期凋亡率明显增加;RT-PCR法检测到TSRP显著抑制细胞mdr-1和survivinmRNA表达,呈剂量依赖性;Western blot法显示TSRP显著抑制NF-κB/P65、NF-κB/P50和IκBα的活性,并且抑制P-gp和survivin表达,均呈剂量依赖性. 结论：TSRP通过NF-κB信号通路调控白血病K562/AO2细胞mdr-1和survivin基因表达,针对NF-κB信号途径研究开发抗白血病中药有效成分是中医药发展的一个方向.

摘要： 目的：探讨茅莓总皂苷(TSRP)调控K562/A02细胞NF-κB信号通路对mdr-1和survivin基因表达的影响,为逆转耐药提供依据. 方法：MTT法观察不同浓度TSRP对K562/A02细胞的抑制增殖作用;Annexin V-FITC/PI法检测不同浓度TSRP诱导K562/A02细胞凋亡;RT-PCR法检测不同浓度TSRP对mdr-1和survivin基因mRNA表达的影响;Western blot法检测不同浓度TSRP处理K562/A02细胞后NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα、PgP和survivin的表达. 结果：MTT显示TSRP在浓度200、400和800μg/ml范围内对K562/A02细胞生长抑制呈剂量依赖性,浓度400和800μg/ml时吸光度分别为0.57±0.03和0.37±0.01,与空白对照组0.83±0.05比较,P均＜0.05;Annexin V-FITC/PI细胞凋亡显示经不同浓度TSRP处理后,细胞的早期凋亡率明显增加;RT-PCR法检测到TSRP显著抑制细胞mdr-1和survivinmRNA表达,呈剂量依赖性;Western blot法显示TSRP显著抑制NF-κB/P65、NF-κB/P50和IκBα的活性,并且抑制P-gp和survivin表达,均呈剂量依赖性. 结论：TSRP通过NF-κB信号通路调控白血病K562/AO2细胞mdr-1和survivin基因表达,针对NF-κB信号途径研究开发抗白血病中药有效成分是中医药发展的一个方向.

摘要： 目的：探讨茅莓总皂苷(TSRP)调控K562/A02细胞NF-κB信号通路对mdr-1和survivin基因表达的影响,为逆转耐药提供依据. 方法：MTT法观察不同浓度TSRP对K562/A02细胞的抑制增殖作用;Annexin V-FITC/PI法检测不同浓度TSRP诱导K562/A02细胞凋亡;RT-PCR法检测不同浓度TSRP对mdr-1和survivin基因mRNA表达的影响;Western blot法检测不同浓度TSRP处理K562/A02细胞后NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα、PgP和survivin的表达. 结果：MTT显示TSRP在浓度200、400和800μg/ml范围内对K562/A02细胞生长抑制呈剂量依赖性,浓度400和800μg/ml时吸光度分别为0.57±0.03和0.37±0.01,与空白对照组0.83±0.05比较,P均＜0.05;Annexin V-FITC/PI细胞凋亡显示经不同浓度TSRP处理后,细胞的早期凋亡率明显增加;RT-PCR法检测到TSRP显著抑制细胞mdr-1和survivinmRNA表达,呈剂量依赖性;Western blot法显示TSRP显著抑制NF-κB/P65、NF-κB/P50和IκBα的活性,并且抑制P-gp和survivin表达,均呈剂量依赖性. 结论：TSRP通过NF-κB信号通路调控白血病K562/AO2细胞mdr-1和survivin基因表达,针对NF-κB信号途径研究开发抗白血病中药有效成分是中医药发展的一个方向.

摘要： 本发明提出一种靶向JAK/STAT和NFκB信号通路的双重抑制剂及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种新型的能够靶向JAK/STAT和NFκB信号通路的双重抑制剂L971‑0101，其对前列腺癌细胞系DU145中STAT3磷酸化和宫颈癌细胞系Hela中TNFα诱导的IκB降解具有抑制作用，此外在体内还可减轻LPS诱导的败血症休克小鼠症状，有效提高其存活率，提示其可作为一种潜在的炎症抑制剂，并具有治疗败血症的潜力。

摘要： 本发明公开了一种基于NF‑κB信号通路的高通量气道炎症药物筛选细胞模型的制备方法及其应用；该制备方法以支气管平滑肌细胞或支气管上皮细胞作为源细胞，利用刺激因子激活细胞内的NF‑κB，并通过均相时间分辨荧光技术，测定细胞内总NF‑κB比率和磷酸化NF‑κB比率，得NF‑κB的磷酸化水平；通过调整参数使模型组细胞内NF‑κB的磷酸化水平与正常组的比值≥1.2，得到细胞模型。本发明通过筛选细胞类型、密度，刺激因子类型、浓度和刺激时间等条件对NF‑κB磷酸化的影响，并采用HTRF法检测细胞中NF‑κB的磷酸化程度，进而构建了炎症细胞模型，为气道炎症药物筛选研究提供了依据。

摘要： 本发明公开了一种RDH10基因用于制备TWEAK‑NF‑κB信号通路阻断剂的应用。RDH10基因表达和胶质瘤等级之间呈正相关，所述RDH10基因敲除在体外调控神经胶质瘤细胞增殖，将导致细胞S和G2/M期停滞，抑制RDH10基因使胶质瘤细胞生长迟滞并将导致胶质瘤细胞的细胞侵袭能力下降。RDH10基因敲除改变了TNFRSF12A(TWEAKR)，TRAF1，TRAF3，BMPR2，TNFAIP3，NFKBIA，NFKBIE和IKBKB的相关表达，该结果显示RDH10可能通过调控TWEAK‑NF‑κB信号通路影响胶质瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期。本发明通过研究发现RDH10在胶质瘤发生和进展中发挥着重要作用。RHD10基因的功能研究为人类神经胶质瘤的靶向治疗提高强有力的手段。

摘要： 本发明公开了一种检测TLR7/8介导的NF‑κB信号通路中关键分子含量的特异性引物，序列如下：用于对TLR7进行定量PCR的特异性引物，序列如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2所示，该序列与猪TLR7mRNA的一段互补；本发明有效的缩短实验时间、减少经费的使用等。通过优化的实验反应体系和反应条件，组成检测灵敏、方便的试剂盒，为TLR7/8介导的MyD88依赖型NF‑κB信号通路中关键分子提供可靠的检测技术。

摘要： 本发明提供了七叶内酯在制备抑制NF‑κB/MAPK信号通路的产品中的应用，属于生命科学和生物医药技术领域。本发明提供了七叶内酯在制备抑制NF‑κB/MAPK信号通路的产品中的应用，所述产品优选为药品或者实验试剂，所述药品或者实验试剂优选包括七叶内酯和辅料。本发明研究发现，七叶内酯发挥抗炎作用的机制与抑制NF‑κB/MAPK信号通路密切相关，七叶内酯具有明显的NF‑κB/MAPK信号通路抑制作用，可用于制备具有抑制NF‑κB/MAPK信号通路功能的产品。

摘要： 本发明提供八宝丹在制备NF‑κB‑UPS信号通路抑制剂中的用途以及在制备用于预防或治疗肌肉萎缩和/或癌症恶病质的药物中的用途。本发明通过研究八宝丹对小鼠成肌细胞中TNF‑α激活的NF‑κB‑UPS信号通路的影响，证明了八宝丹可以抑制小鼠成肌细胞中TNF‑α激活的NF‑κB‑UPS信号通路，进而可以用于预防或治疗肌肉萎缩和/或癌症恶病质。

摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及PAK4抑制剂在制备靶向抑制STAT3和NFκB信号通路的药物中的应用。PF‑3758309hydrochloride作为能够靶向STAT3和NFκB信号通路的双重抑制剂，对小鼠巨噬细胞中LPS诱导的TNFα的活性具有抑制作用，在体内还可减轻LPS诱导的败血症休克小鼠症状，有效提高其存活率，提示其可作为一种潜在的炎症抑制剂，并具有治疗败血症的潜力。

摘要： 本发明涉及GATA4抑制剂在抑制NF‑κB/STAT3信号通路中的用途，本发明经前期研究推测出：USP28通过去泛素化调节MYC的稳定性，从而促进MYC表达量上调，接着使GATA4启动子区域去甲基化，使GATA4表达上调，通过激活NF‑κB/SASP及Reg3β/STAT3这两条炎症相关信号通路促进胰腺“炎癌转化”的过程。其优点表现在：本发明以转录因子GATA4为切入点，以探讨USP28/MYC/GATA4信号轴促进胰腺“炎癌转化”为中心，旨在从转化的新角度理解胰腺癌的成因，为防治胰腺癌提供新的方法和思路。

摘要： 本发明提出一种靶向JAK/STAT和NFκB信号通路的双重抑制剂及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种新型的能够靶向JAK/STAT和NFκB信号通路的双重抑制剂L971‑0101，其对前列腺癌细胞系DU145中STAT3磷酸化和宫颈癌细胞系Hela中TNFα诱导的IκB降解具有抑制作用，此外在体内还可减轻LPS诱导的败血症休克小鼠症状，有效提高其存活率，提示其可作为一种潜在的炎症抑制剂，并具有治疗败血症的潜力。

摘要： NF‑κB信号通路抑制剂在制备抑制急性淋巴细胞性白血病复发的药物中的应用，它涉及一种分子调控剂在制备抑制急性淋巴细胞性白血病复发的药物中的应用。本发明以NF‑κB信号通路抑制剂作为制备抑制急性淋巴细胞性白血病复发药物中的活性成分。本发明根据急性淋巴细胞性白血病治疗后耐药复发的分子机制，建立了全新体系的治疗药物，可实现靶向给药，对降低儿童急性淋巴细胞性白血病化疗后患儿的复发率具有重大意义。